一些成熟細胞相比，干細胞的體外培養(yǎng)條件要求相對苛刻，因為它在體外培養(yǎng)條件下容易自然分化而失去干細胞的基本特性。

干細胞的體外培養(yǎng)難點是既要維持干細胞的“干性”，又要令其增殖而保持未分化狀態(tài)。

由于不同來源的干細胞，其生長特性差異較大，體外培養(yǎng)條件也有一定差別，一般需要根據(jù)不同類型的干細胞建立相應的個性化培養(yǎng)體系，特別是將某種干細胞建成細胞系，更需要建立穩(wěn)定的培養(yǎng)技術(shù)。

體外制備干細胞包括干細胞或富含干細胞的材料采集、分離純化、擴增、鑒定及儲存等過程，分離、培養(yǎng)過程需要在無菌層流實驗室中進行，需要在培養(yǎng)體系中添加一些維持其“干性”和促進增殖的因子。