免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)有多種染色方式,根據(jù)標(biāo)記物的種類(lèi)可分為免疫熒光法、免疫酶標(biāo)法、免疫鐵蛋白法及免疫膠體金法等。
其中,免疫熒光法結(jié)合激光共聚焦掃描顯微鏡技術(shù),大大提高了檢測(cè)的分辨率,可以更為精確地檢測(cè)抗原的細(xì)胞定位及分布。
免疫熒光技術(shù)是先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)相應(yīng)抗原(抗體)。
在細(xì)胞中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有標(biāo)記的熒光素,受激發(fā)光照射后,由低能態(tài)進(jìn)入高能態(tài),而高能態(tài)的電子是不穩(wěn)定的,以輻射光量子的形式釋放能量后,再回到原來(lái)的低能態(tài)的過(guò)程中可以發(fā)出明亮的熒光,利用熒光顯微鏡可看見(jiàn)熒光所在的細(xì)胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)和定位,并可以利用定量技術(shù)測(cè)定含量。